Investigação do potencial antiartrítico do ácido trans-aconítico: incorporação em microesferas mucoadesivas e síntese de ésteres

Echinodorus grandiflorus (Cham. & Schltdl.) Micheli (Alismataceae), especie popularmente conhecida como chapeu-de-couro, e utilizada tradicionalmente no tratamento de diferentes doencas inflamatorias, incluindo artrites. Estudos anteriores de nosso grupo de pesquisa demonstraram atividade anti-inflamatoria e antinociceptiva de diferentes extratos, fracoes e constituintes da especie, incluindo o acido trans-aconitico (ATA), em ensaios in vitro e in vivo. O presente estudo teve como objetivo aprimorar as propriedades biofarmaceuticas do ATA, visando explorar seu potencial antiartritico, utilizando duas estrategias: (i) obtencao de formulacoes de microesferas mucoadesivas de ATA (ME-ATA); (ii) sintese de esteres de ATA. No caso da primeira, foram produzidas sete formulacoes distintas de ME-ATA, utilizando diferentes proporcoes de polimeros. As formulacoes foram avaliadas quanto a taxa de encapsulacao, tamanho medio de particulas e indice de polidispersao. O teor de ATA nas formulacoes foi determinado por um metodo de CLAE desenvolvido e validado para este proposito. A formulacao F3c (composta por proporcoes iguais de massa de HPMC, carbopol e ATA) apresentou a maior taxa de encapsulacao e foi caracterizada quanto a morfologia (MO e MEV), caracteristicas fisico-quimicas e termicas por espectroscopia FT-IV, DSC, TG e potencial zeta. Os dados obtidos indicaram estabilidade da formulacao e pouca interacao entre a matriz e o ATA. Os esteres de ATA foram obtidos por reacao de esterificacao de Fisher com tres alcoois distintos (etanol, n-butanol e n-octanol) na presenca de H2SO4 (2,7% v/v) a 75°C por 2 horas. O estudo da cinetica das reacoes possibilitou otimizar as condicoes reacionais, tendo sido obtidos rendimentos globais (somatoria de mono, di e triesteres) de 85,4%, 37,7% e 71,3% nas reacoes com etanol, n-butanol e n-octanol, respectivamente. Foram obtidas misturas de monoesteres e diesteres, as quais foram caracterizadas por tecnicas cromatograficas (CCD, CLAE-DAD e ULPC-ESIMS) e espectroscopicas (UV, IV e MS). As misturas de diesteres e os triesteres foram caracterizados por tecnicas mono e bidimensionais de RMN de 1H e de 13C. A formulacao e os esteres obtidos foram avaliados em modelo de artrite aguda induzida por LPS na cavidade femur-tibial de camundongos. A formulacao F3c prolongou a reducao do acumulo neutrofilico por ate 30 horas de pre-tratamento em comparacao ao ATA livre administrado em dose equivalente. Todos os esteres obtidos reduziram os parâmetros inflamatorios avaliados de forma igual ou superior ao ATA, sendo os diesteres os compostos mais ativos. Os diesteres apresentaram atividade superior ao ATA no intervalo de doses de 1,73 a 17,3 µmol/Kg, promovendo diminuicao no acumulo celular, em especial de neutrofilos, e reducao de MPO e CXCL-1. A mistura de diesteres octilicos foi avaliada em modelo agudo e cronico de artrite induzida por antigeno, promovendo reducao dos parâmetros inflamatorios avaliados de forma igual ou superior ao ATA. Em conclusao, os resultados obtidos indicam estabilidade da formulacao F3c e prolongada atividade anti-inflamatoria em comparacao ao ATA livre, bem como promissora atividade antiinflamatoria para os diferentes esteres obtidos, em especial para a mistura de diesteres octilicos, ativa em modelos de artrite aguda e cronica em doses inferiores ao ATA.