Biomarqueurs pronostiques et prédictifs des CBNPC de stades précoces : étude moléculaire de l'essai de phase 3 IFCT 0002

L’objectif de ce travail de these etait d’analyser selon un plan statistique rigoureux et conforme aux recommandations REMARK, le caractere pronostique et/ou predictif de 18 biomarqueurs moleculaires et de l’expression de la β-Tubuline de Classe III (TUBB3) chez les patients avec CBNPC de stade I-II inclus dans l’essai de phase III de chimiotherapie peri-operatoire IFCT-0002. La methylation du promoteur de RASSF1A et l’expression de TUBB3 se sont averees de puissants facteurs pronostiques independants de survie. Nous avons mis en evidence pour la premiere fois le caractere predictif independant de la methylation de RASSF1A sur la survie sans recidive des patients traites par une chimiotherapie a base de carboplatine-paclitaxel versus ceux traites par cisplatine-gemcitabine. Ce lien potentiel a ete etaye sur le plan biologique, par la mise en evidence de la modification du phenotype de lignees de cellules epitheliales bronchiques immortalisees, secondaire a l’invalidation de RASSF1A par ARN-interference, en rapport avec une redistribution de la tubuline. Par ailleurs, nous avons confirme sur le plan experimental le lien statistique retrouve entre K-RAS et l’expression de TUBB3, puisque la depletion de la proteine K-RAS par deux transfection de petits ARN-interferents specifiques, et l’inhibition pharmacologique des effecteurs de la voie de signalisation de K-RAS (Raf, MEK, PI3-K), entraine une diminution de l’expression de la TUBB3 dans ces memes lignees. A l’inverse, les alterations de l’EGFR prises individuellement ou en association (mutation, augmentation du nombre de copies du gene et polymorphisme de l’intron 1A) ne semblent ni pronostiques ou predictives.