Processing of mispaired and unpaired bases in heteroduplex DNA in E. coli(

Resume L'ADN des bacteriophages λ et O × 174, portant des mutations sequencees ont ete utilises pour construire in vitro l'ADN heteroduplex defini. Ces heteroduplex ont ete introduits par transfection dans hote E. coli , en une seule copie, et la descendance des heteroduplex individuels a ete analyses dans chaque centre infectieux. L'effet de la presence ou de l'absence des sequences GATC (systeme O × 174) et de leur methylation (systeme λ) a ete teste. Les conclusions sont : 1) certains mesappariements des bases engendrent le processus de reparation des mesappariements provoquant un transfert localise d'information genetique d'un brin a l'autre; 2) les mesappariements de transition G:T et A:C sont efficacement repares; les six mesappariements de transversion ne sont pas toujours reconnus et repares. La reconnaissance des mesappariements de transversion depend de l'environnement nucleotidique; 3) les bases individuelles non-appariees (« mesappariements de changement de cadre de lecture ) sont reconnues et reparees, certaines avec des efficacites egales sur les deux brins, certains plus efficacement sur le brin plus court (−1); 4) les longues non-homologies (env. 800 paires des bases) ne sont pas reparees par le systeme Mut H, L, S, U, mais un autre systeme, peu efficace, repare les non-homologies; 5) la methylation complete des sequences GATC inhibe la reparation sur le brin methyle; ceci presente la base chimique de la discrimination entre les brins parentaux et neosynthetises dans la correction des erreurs de replication; 6) les sequences GATC non-methylees augmentent l'efficacite de la reparation d'un mesappariement G:T dans l'ADN de O × 174, mais on ne peut pas exclure la possibilite d'une reparation residuelle meme dans l'ADN de O × 174 sans sequences GATC; 7) la reparation des mesappariements dans l'heteroduplex non-methyle peut devenir lethale, probablement en provoquant les cassures double-brin. Nos resultats indiquent que les mesappariements qui sont efficacement repares presentent les erreurs de replication les plus frequentes : G:T; A:C et (−1).