Purification, caractérisation physicochimique et devenir des accepteurs glycoprotéiques des cobalamines (vitamine B 12) dans le transit intraluminal

La purification du facteur intrinseque et de l'haptocorrine salivaire a ete realisee par chromatographie d'affinite et chromatographie liquide a haute performance avec un rendement global respectif de 75 % et de 45 %. Les 2 transporteurs sont des glycoproteines de type mixte avec la presence de 0-glycannes et de N-glycannes, en fonction de leur composition en glucides. La copule glucidique protege globalement le facteur intrinseque mais seulement partiellement l'haptocorrine vis-a-vis des proteases digestives, ce qui explique le transfert de la vitamine B12 de l'haptocorrine sur le facteur intrinseque au niveau du duodenum. La malabsorption de la cobalamine cristalline en cas d'insuffisance pancreatique resulte d'un defaut de degradation de l'haptocorrine, mais aussi de modifications du pH intraluminal gastroduodenal, de l'affluence biliaire et des proteases bacteriennes. En cas de mucoviscidose, ceci explique en partie l'augmentation du contenu enhaptocorrine du meconium. Le facteur intrinseque, que nous avons purifie et marque a l'iode 125 conserve son activite biologique in vitro en presence d'une preparation de recepteur ileal de cobaye solubilise. L'etude de son devenir en preparation de recepteur ileal de cobaye solubilise. L'etude de son devenir en autohistoradiographie, apres instillation in vivo dans l'ileon de cobaye, montre sa localisation preferentielle dans le cytoplasme apical, au voisinage des mitochondries