Altérations de la structure épithéliale des cellules tubulaires rénales en réponse au shear stress

Introduction Le shear stress (FSS) urinaire, genere par l’ecoulement de l’urine dans le tubule renal, est modifie precocement dans la majorite des nephropathies. De recents resultats suggerent que le FSS urinaire pourrait contribuer au developpement de l’inflammation tubulo-interstitielle dans les maladies renales. En revanche, son impact sur l’integrite de l’epithelium tubulaire est largement meconnu. Le but de cette etude est donc d’evaluer par une approche in vitro les effets du FSS sur le phenotype epithelial des cellules tubulaires renales. Materiels et methodes Des cellules HK-2 cultivees a forte confluence sur du collagene IV sont exposees a un FSS laminaire et continu. Les cellules servant de controle sont maintenues en conditions statiques. La structure epitheliale des cellules est evaluee en etudiant par PCR quantitative, western blot ou immunofluorescence les composants des jonctions serrees (claudine-2, Zo-1), des jonctions d’ancrage (E-cadherine, beta-catenine), du complexe Par de polarite apicale (pard3, pard6, cdc42 et PKC-zeta) et du cil primaire (tubuline alpha-acetylee). Resultats Dans les cellules HK-2 soumises pendant 48 h a un FSS d’intensite 0,5 Pa, on observe la disparition de claudine-2. La distribution de ZO-1 est modifiee, son marquage a la membrane devenant discontinu. La quantite d’E-cadherine est diminuee et l’expression de ses represseurs Snail1 et Slug est au contraire augmentee. Le FSS entraine egalement une relocalisation de beta-catenine de la membrane vers le cytoplasme. Il reduit fortement le niveau d’ARNm codant pard6 sans changer l’expression de pard3, cdc42 et PKC-zeta. Enfin, le FSS provoque la perte du cil primaire apical. L’ensemble de ces effets est attenue par des intensites plus faibles de FSS (0,01 Pa et 0,1 Pa) et pour des temps plus courts (5 h et 24 h). Discussion et conclusion Ainsi, en reponse au FSS, les cellules tubulaires perdent un nombre important de leurs caracteristiques epitheliales. Les variations du FSS urinaire pourraient donc jouer un role dans la progression des nephropathies, via la desorganisation de l’epithelium tubulaire.