Analyse protéïque de la réponse au TGF-β des fibroblastes dermiques humains dans la sclérodermie systémique

Introduction La sclerodermie systemique (ScS) est une maladie auto-immune rare caracterisee par une auto-immunite, une vasculopathie et de la fibrose. La fibrose est due a une activation exageree des fibroblastes par le facteur de croissance TGF-β. Nous avons ici etudie la reponse proteique de fibroblastes dermiques de patients atteints de ScS apres stimulation par le TGF-β. Materiels et methodes Des fibroblastes cutanes de 4 patients atteints de ScS et de 3 sujets sains ont ete cultives en presence ou en absence de TGF-β. L’electrophorese en gel bidimensionnel et la spectrometrie de masse (MS) ont ete utilisees pour identifier les proteines differemment exprimees entre les groupes. Les logiciels Ingenuity Pathway Analysis ® (IPA) et Panther ® ont ete utilises pour analyser les proteines identifiees. Enfin, l’analyseur de cellules en temps reel xCelligence ® (RTCA) a ete utilise pour evaluer la proliferation et la viabilite des fibroblastes afin de valider les proteines d’interet identifiees prealablement. Resultats Nous avons identifie 279 taches proteiques differemment exprimees entre les groupes. L’analyse en composantes principales a revele des differences significatives entre les fibroblastes chez les patients atteints de ScS et HC lorsqu’ils ont ete cultives en presence ou en absence de TGF-β. Le logiciel IPA ® a revele des processus specifiques proteiques tels que l’implication dans l’organisation du cytosquelette, la formation d’actine, la signalisation des integrines, le remodelage cellulaire et les jonctions intercellulaires. Le logiciel Panther ® a revele des processus biologiques differentiels tels que les processus cellulaires, les processus metaboliques et l’organisation des composants cellulaires. Le TGF-β a augmente la synthese des proteines des fibroblastes impliquees dans le cytosquelette, la formation d’actine et la signalisation des integrines. En utilisant IPA et RTCA, nous avons identifie et valide la participation du recepteur du facteur de croissance epidermique (EGFR) et de la phosphatidylinositol 3 kinase (Pi3 K) dans la proliferation et la viabilite des fibroblastes chez les patients atteints de ScS. Conclusion Nous avons confirme que le profil de proteome des fibroblastes differe entre les patients atteints de ScS et les sujets sains et demontre que les fibroblastes augmentent leur proteome lors de la stimulation par le TGF-β. Nous avons finalement mis en evidence EGFR et Pi3 K comme proteines d’interet des fibroblastes de patients atteints de ScS et pourraient etre considerees comme de potentielles cibles pour inhiber la fibrose dans la ScS.